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小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA Kit

产品时间:2023-11-01

访问次数:473

简要描述:

小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA Kit
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。

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品牌AMEKO供货周期现货
应用领域化工,生物产业

小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA Kit

小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA Kit

试剂盒工作原理

本试剂盒采用的是生物/素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中小鼠肿瘤坏死因子α水平。向预先包被了小鼠肿瘤坏死因子α单克隆抗体的酶标孔中加入小鼠肿瘤坏死因子α,温育;温育后,加入生物/素标记的抗小鼠肿瘤坏死因子α抗体。再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中小鼠肿瘤坏死因子α的浓度呈正相关。


实验操作步骤

1. 从室温平衡30min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.加样:1)空白孔,空白对照孔只加显色剂A&B和终止液。其余各步操作相同;2)标准品孔:加入标准品50ul,链霉亲和素-HRP50ul;3)待测样品孔:加入样本40ul,然后各加入抗体10ul、链霉亲和素-HRP50ul;

3.盖上封板膜,轻轻震荡混匀,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

4. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置30秒,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

5. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

6. 每孔加入终止液50μL,10min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

7.根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的回归方程,再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。

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