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甘油醛-3-磷酸脱氢酶的介绍
  • 发布日期:2022-12-13      浏览次数:646
    • 该酶是糖酵解反应中的一个酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa。该酶基因为管家(house keeping)基因,几乎在所有组织中都高水平表达,在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的,且不受含有的部分识别位点、佛波脂等的诱导物质的影响而保持恒定,故被广泛用作抽提total RNA,poly(A)+ RNA,Western blot等实验操作的标准化的内参。常用的内参有,ACTBβ-actin、β-肌动蛋白)、GAPDH或18S等。目的是在于避免RNA定量误差、加样误差以及各PCR反应体系中扩增效率不均一、各孔间的温差等所造成的误差、这些都是管家基因,在各个组织中的表达量相对稳定,其中18S同整个基因谱有关(负责装配),它在总RNA中占的比例最高。

      转染了GAPDH相关siRNA的HeLa细胞在转染后48小时后不断增殖。 红:被标记的siRNA;蓝:被染色的细胞核;绿色:GAPDH蛋白。

      阴性对照scrambled siRNA)的导入(左)对GAPDH蛋白的表达没有影响,不过若转入一个以GAPDH(右)为靶标的siRNA,则会导致GAPDH蛋白表达水平的急剧下降。


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