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浅析透析胎牛血清的生产工艺
  • 发布日期:2022-06-28      浏览次数:559
    •   细胞培养基作为细胞培养基的组成成分,胎牛血清为细胞生长提供激素、生长因子、结合蛋白、脂质、矿物质、黏附因子等物质,促进体外细胞培养。
        但在某些研究中,需要避免胎牛血清中一些小分子物质的影响,就需要用到特殊处理的血清——透析胎牛血清
        透析胎牛血清的生产工艺
        1、透析胎牛血清是在胎牛血清的基础上进行加工的
        胎牛血清在无菌条件下要经过多重过滤,进行一系列的检测:
        理化性质检查(如渗透压和pH值)
        成分检查(如内毒素和血红蛋白)
        外源因子检查(如细菌、病毒和支原体)
        促进细胞增殖的检查等
        透析胎牛血清为保证其性能和安全性,也需具备胎牛血清的这些工艺和检查。
        2、透析胎牛血清,需经过透析处理
        在4°C下用特定的透析膜对血清在0.15M NaCl中透析。由于该透析膜只允许10 kDa以下的小分子穿过,在渗透压的作用下,这些小分子便从血清中渗析到透析膜外的NaCl溶液中。10 kDa以下的小分子有化学小分子、核苷酸、某些激素、盐、低分子量蛋白质、氨基酸、细胞因子、葡萄糖、残留抗生素和其他外源分子。
        那么透析的效果如何?以及透析到何时呢?
        由于不可能监测全部小分子,因此常选用葡萄糖为代表。血清中葡萄糖<5 mg/dL,即可以停止透析了。透析过程中,除监测葡萄糖浓度外(可采用葡萄糖氧化酶方法测定),还需仔细监测pH值和渗透压。
        3、该透析一般采用切向流过滤
        也就是液体流动方向与过滤方向呈垂直方向的过滤形式。透析胎牛血清该方式使液体流动在滤膜表面产生剪切力,减小了滤膜上的物质堆积,保证了稳定的过滤速度。
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