在细胞培养中,
BI胎牛血清的保存是至关重要的,它直接影响到细胞培养的质量和实验的准确性。以下是关于如何保存BI胎牛血清的详细步骤和注意事项:
一、存储温度
1.长期保存:BI胎牛血清需要长期保存时,应储存于-20℃至-70℃的低温冰箱中。这是为了确保血清中的活性成分在低温下保持稳定,避免降解。
2.短期存放:若血清需要短期存放(如几天到一周内使用),可放置于4℃冰箱中,但时间切勿超过1个月。长时间在4℃下存放会导致血清质量下降。
二、解冻与分装
1.逐步解冻:从低温冰箱中取出的血清,应先置于4℃冰箱中溶解1天,然后移至室温下继续溶解,直至溶解。在溶解过程中,需轻轻摇晃血清瓶,确保温度与成分均一,减少沉淀的发生。
2.无菌分装:血清溶解后,应立即进行无菌分装。一般建议将40~45ml血清分装于无菌的50ml离心管中,以减少反复冻融的次数,因为每次冻融都会进一步损害血清的质量。
三、避光与防止污染
1.避光保存:BI胎牛血清容器应避免直接暴露于光线中,因为光照可能会降解血清中的某些成分。可以使用不透明或具有遮光功能的容器来保存血清。
2.防止污染:在处理血清时,必须确保操作环境干净,使用无菌技术和工具来避免细菌、真菌或其他污染物的引入。如果发现血清有悬浮物,应将其加入培养液内一起过滤,而非直接过滤血清。
四、注意事项
1.预留空间:由于血清在结冰时体积会增加约10%,因此在将血清放入低温冰箱前,必须预留足够的空间,以防止血清瓶因体积膨胀而破裂或造成污染。
2.避免热灭活:除非必须,一般不建议对BI胎牛血清进行热灭活处理。因为热灭活虽然可以灭活血清中的补体成分,但也会显著增加血清中的沉淀物,并影响血清的质量。
3.及时使用:解冻后的血清应尽快使用,避免长时间放置导致质量下降。同时,应避免反复冻融,以保持血清的最佳状态。
通过正确的存储温度、解冻与分装方法、避光与防止污染措施以及注意事项的遵循,可以确保BI胎牛血清在细胞培养中的质量和稳定性。