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细胞爬片使用前需要做哪些准备?
  • 发布日期:2024-03-26      浏览次数:260
    • 细胞爬片又名玻片,是指让玻片浸在细胞培养基内,细胞在玻片上生长,主要用于组织学,免疫组织学,冰冻切片,细胞涂片,原位杂交等。
      除了在实验中的使用,实验前的准备也十分重要,让我们一起来看看使用前需要做哪些准备吧!
      用前准备:
      1、盖玻片的选择
      爬片可用一般的盖玻片,也可用专用细胞爬片,价格比较昂贵但是细胞贴壁牢固,拍出照片效果好;
      2、爬片的剪裁
      可根据自己的需要,到染色时再将之切开,这样既保证了细胞均一性,又可同时做几个指标的染色剪裁成合适大小,置于6孔板、12孔板或24孔板;
      3、爬片的使用前处理
      将剪裁好的爬片,置于浓硫酸中浸泡并过夜,第二天先用自来水冲洗20遍,再置于无水酒清中浸泡6小时,再用三蒸水冲洗3遍,放在饭盒或者玻璃培养皿中烘干后进行高压消毒。
      高压后取出放入烤箱中烤干,备用,烤干后可放入超净台中。
      另外,在保存细胞爬片的时候,一般用培养皿或板,先在皿底放一层面巾纸,然后再放爬片,这样方便做实验时取片。
      细胞爬片取出后,一般用PBS洗2遍,然后再做固定。
      当然也有例外,比如做凋亡的TUNEL染色时就避免洗,因为凋亡的细胞在洗的过程中有可能会脱落。
      然后盖上盖子,并在盖子上做标记,为避免混淆,可用透明胶带将盖子和皿连在一起。一般-20℃保存2-3个月的片子做免疫组化是没有问题的。

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