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在PCR反应体系中添加剂DMSO的作用
  • 发布日期:2023-12-27      浏览次数:1194
    • DMSO主要用于高GC含量的模板扩增,可能的机理是改善GC含量高的DNA的变形情况,降低其二级结构,使得聚合酶在二级结构处延伸。
      DMSO可以提高PCR的特异性,帮助扩增一些难扩的模板。
      当体系中加入DMSO时,可适当降低退火温度。
      在实践中,聚合酶链式反应可能因各种原因而失败,通常表现为两个问题,一是目的模板的扩增量太少,二是非目的基因扩增太多。
      这种情况研究人员通常会在反应体系中加入合适的添加剂进行解决。
      通常添加剂的作用主要是降低基因的二级结构或者降低非特异性的启动。

      下面是几种常用的添加剂以及它们的作用:
      ① 二甲基亚砜DMSO、非离子性洗涤剂、甜菜碱——可以降低DNA二级结构
      ② 甲酰胺、四甲基氯化铵TMAC——降低非特异性启动
      ③ 镁离子——聚合酶的一个辅因子
      ④ 牛血清白蛋白——减少污染物

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