PBS缓冲液(Phosphate Buffered Saline)是一种常见的生化实验室缓冲液,广泛应用于细胞培养、免疫组织化学、免疫荧光染色、流式细胞术等领域。 1. 配制方法:
PBS缓冲液的基础成分包括磷酸盐、氯化物和纳米级水。以下是一种常用的配制方法:
- 取1升去离子水(DI水),加入8克NaCl(氯化钠)、0.2克KCl、1.44克Na2HPO4(磷酸二氢钠)和0.24克KH2PO4(磷酸氢二钾)。
- 溶解以上成分,并用去离子水调整pH值至7.4。
- 过滤溶液以去除杂质,并用无菌技术储存。
2. 优势与应用:
- 细胞培养:缓冲液在细胞培养中可用于洗涤细胞、稀释培养基和悬浮细胞。由于其温和的离子浓度和pH值,不会对细胞造成伤害。
- 免疫组织化学:缓冲液可用于固定、洗涤和稀释组织样本,以提供稳定的环境,保持抗原的完整性,并降低非特异性背景信号。
- 免疫荧光染色:缓冲液可用于洗涤和稀释荧光标记的抗体,帮助清除未结合的抗体,并提供适当的缓冲环境,使荧光染色结果更准确。
- 流式细胞术:缓冲液可用作样本洗涤缓冲液,以去除细胞培养基中的血清蛋白、细胞碎片和细胞器,防止堵塞仪器和影响分析结果。
PBS缓冲液是一种重要的实验室工具,在生命科学研究领域中有广泛应用。通过了解PBS缓冲液的配制方法和优势,我们可以更好地利用它在实验中的作用,提高实验结果的准确性和可靠性。