产品展示
PRODUCT DISPLAY
技术支持您现在的位置:首页 > 技术支持 > 培养基配置与储存
培养基配置与储存
  • 发布日期:2023-04-18      浏览次数:629
    • 实验材料

      基础培养基(液体或干粉);PET/PETG方形试剂瓶;血清(常规为FBS/NBS);补充剂;移液枪;电动移液枪;15mL、50mL无菌离心管;灭菌超纯水;盒装无菌吸头;血清移液管;超净工作台;双抗(青链霉素混合液);杯式滤器(0.22μm PES膜);针式滤器 (0.22μm PES膜) 
       

      实验准备

      血清准备:
      配置培养基前一天,将所需血清从-20℃冰库取出,放置入2-8℃冰箱缓慢解冻储存,使用前37℃水浴加热。
      培养基准备:
      液体基础培养基使用前37℃水浴加热。
       

      实验流程

      基础培养基配置(干粉):

      根据配置体积,选择合适的灭菌后容器,在容器中倒入约90%体积的超纯水,将培养基干粉全部倒入该容器中,用少量超纯水将袋内残留粉末洗出。
      搅拌30min使所有成分溶解,待溶液澄清后,根据说明书加入适当量的碳酸氢钠(分析纯),继续搅拌5-10min至溶解,随后超纯水定容并调节PH值。(过滤会使培养基PH值稍微偏高,所以用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调整PH值至7.20-7.30)
      使用0.22μm杯式滤器或0.22μm针式滤器过滤除菌,并按照日常使用规格分装入PET/PETG方形试剂瓶中,2-8℃条件下避光保存备用。


       


      培养基配置:
      若含有补充剂,用1000μL无菌吸头取出适量预热完成的基础培养基,注入补充剂西林瓶中,将其充分溶解,再将含有补充剂的培养基转移入基础培养基中。

      接着按照血清使用比例,用血清移液管吸取适量预热完成的血清,注入基础培养基中,盖上瓶盖充分混匀。

      双抗加入:
      除了特殊筛选系统外,一般正常培养状态下,培养基中不添加任何抗生素。若为防止细菌、真菌污染,或怀疑细胞污染需要清除细菌,可以加入青霉素-链霉素双抗溶液,其培养基中的终浓度为青霉素100U/ml,链霉素为100ug/ml。
      培养基保存:
      将配置后的培养基2-8℃条件下,避光保存备用;或按照使用需求分装入对应规格的PET/PETG方形试剂瓶中。隔夜或1-2天后观察培养基,溶液澄清通透且无染菌,方可使用。
      使用多余的血清,按照剩余量,可分装入15mL/50mL的无菌离心管中(防止血清冻存后膨胀泄露问题,离心管工作体积建议为80%),亦可分装入合适规格的PET/PETG方形试剂瓶中,并用封口膜封口,-20℃条件下避光保存。


    联系方式
    • 电话

      400-0918-500

    • 传真

    在线客服