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MEM培养基是哺乳动物细胞的理想培养基
  • 发布日期:2021-03-29      浏览次数:974
    •   MEM培养基它仅含12种必须氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。广泛适用于各种已建成细胞系的培养,同时添加或减少某些成分,也适于特殊细胞的培养。如Hela细胞、各种成纤维细胞、内皮细胞、人肿瘤细胞等。是哺乳动物细胞的理想培养基,通常用于贴壁细胞的培养,通过对配方进行修正,可以用于其他类型细胞的培养,如无钙MEM培养基可以用于悬浮细胞的培养,含有Hank’s盐的MEM培养基可以用于二倍体细胞的培养。
        配方
        1配置前准备:配置MEM培养基新制备的milli water。调节pH值的酸碱溶液也应该使用这种水配置。制备培养基的器皿清洗干净,并用milli water润洗两次。
        2.溶解培养基:取5%终体积的milli water,加入到1L玻璃杯中,将干粉培养基倒入烧杯,水洗包装袋内面两次,倒入培养液中。磁力搅拌助溶。
        3.补加试剂:根据包装袋说明加入NaHCO3(2.2g),HEPES(2.383,10mmol)、非必需氨基酸(可不加,10ml)。
        4.加抗生素:一般抗生素终浓度--青霉素100U/ml,链霉素100U/ml。1L加入10m储备液。
        5.调pH值:加水到1000ml,然后用HCL或者NaOH调节pH到7.2。
        6.过滤除菌:采用0.22um滤膜。过滤后分装于小瓶中(100或200ml)。过滤后pH值一般上升0.1-0.3。
        7.加小牛血清:根据MEM培养基配置的量将小牛血清分装,冷冻保存(-20度)。临用前将加入小牛血清10%。
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